Дезинфекция и стерилизация лабораторной посуды

Дезинфекция в клинических лабораторных комплексах регулируется СанПиН 2.1.3678-20. В представленных методических указаниях перечислены разные дезинфекционные средства, которые производится отечественными и зарубежными производителями.

Виды обработки лабораторной посуды и инструментов

Сегодня используются следующие способы обеззараживания лабораторной посуды:

• дезинфекция;
• предстерилизационная очистка;
• стерилизация.

В процессе дезинфекции уничтожаются патогенные и условно-патогенные микроорганизмы. Предварительная обработка выполняется с помощью замачивания в растворе, а затем проводится удаление оставшихся пятен и используемого моющего средства. После этого выполняется стерилизация и уничтожение микроорганизмов.

В современной лаборатории дезинфекция лабораторной посуды выполняется с помощью химического способа и использования дезрастворов, приготовленных в определённой концентрации. Для этого требуются специальные контейнеры из пластика с выполненной маркировкой.

Что обеззараживается в лаборатории?

В настоящее время проводится дезинфекция следующей лабораторной посуды и инструментария:

• предметные стёкла, пипетки, резиновые груши, бюксы и другие предметы, которые относятся к лабораторному инструментарию и посуде;
• специальная рабочая одежда;
• разнообразная лабораторная аппаратура, к примеру, центрифуга, колориметр и другая техника;
• разные предметы мебели и присутствующие поверхности;
• одноразовые расходные материалы, которые контактировали с кровью, например, иглы, медицинские маски и перчатки.

Оборудование, которое соприкасалось с разными биологическими жидкостями, обрабатывается с учётом материала изготовления. Окуляры микроскопа очищаются с помощью воздуходувки для линз, а затем тщательно протираются бумагой для стекол, которая предварительно смачивается 70% спиртом. Виды, методы и способы дезинфекции могут различаться.

Обеззараживание кюветов и пластиковых инструментов выполняется с помощью замачивания в приготовленном дезрастворе. Отдельные детали используемого оборудования могут помещаться в автоклав или стерилизоваться в сухожаре. Элементы аппарата, которые не могут замачиваться и подвергаться термической обработке, тщательно протираются дезрастворами. Для дезинфекции помещения используются хлорсодержащие растворы, хлоргексидин и альдегидосодержащие средства.

Мебель и приборы, на которой попала кровь и другие биологические материалы, немедленно протираются ветошью, которая предварительно замачивается в дезрастворе. Зачем использованная ветошь подлежит утилизации и помещается в специальную ёмкость с дезраствором. Таким же образом проводится утилизация лабораторной посуды.

Рамка для дезинфекции людей в лабораторном комплексе используется для распыления дезраствора на одежду и окружающие поверхности. Стирка рабочей спецодежды в домашних условиях находится под запретом. В медицинских учреждениях должно быть всё необходимое для стерилизации одежды с помощью специального оборудования.

Дезинфекция в лаборатории

Дезинфекция и стерилизация использованной лабораторной посуды выполняется с помощью ее погружения в раствор для замачивания на определенное время, которое указывается в инструкции. На крышке используемой ёмкости обязательно указывается название дезраствора, его концентрация и точное время приготовления. Повторное использование раствора при этом запрещается, а отработанный материал выливается в канализацию. Контейнер тщательно моется и при необходимости наполняется снова.

Для стерилизации стеклянной лабораторной посуды используются хлор- и альдегидосодержащие растворы, например, хлорамин, сульфохлорантин и другие материалы. Сегодня в лабораторной практике не используются формалин, который является высокотоксичным веществом, а также 6% перекись водорода из-за повышенной взрывоопасности. В современной лаборатории всегда должен присутствовать запас растворов, причём на каждый из них требуется документация. Подготовка лабораторной посуды к стерилизации и дезинфекции выполняется в специальном помещении с подведенным горячим и холодным водоснабжением и достаточным количеством места для установки контейнеров с приготовленными растворами. 

Предстерилизационная очистка

Одним из методов стерилизации лабораторной посуды является обязательная предстерилизационная очистка. После экспозиции в дезинфекционном растворе одноразовые расходники подлежат утилизации, а многоразовая посуда подготавливается к предстоящей стерилизации для обеспечения ее микробиологической чистоты. В помещении моечной чашки Петри моются под струей проточной воды и очищаются небольшими щеточками. Для стаканов и пробирок используются ёршики. В процессе мойки удаляются остатки крови или других жидкостей. Скрытая кровь определяется с помощью азопирамовой пробы.

Особая осторожность при подготовке лабораторной посуды к работе выполняется при мытье пипеток, бюреток и других предметов из-за их высокой хрупкости. Перед выполнением работы в моечных помещениях руки обязательно защищаются резиновыми перчатками, которые также обрабатываются дезинфекционным средством. Для защиты органов дыхания может использоваться маска.

В действующих клинико-диагностических лабораториях каждый день контролируется качество выполняемой предстерилизационной обработки при подготовке лабораторной посуды. Осмотру подвергаются не менее 5 единиц изделий из каждой группы, что особенно важно для пробирок с кровью. Экземпляры тестируются на наличие крови и остатки моющего средства, причём при положительной пробе повторно обрабатывается вся рассматриваемая группа. При отрицательной пробе фиксация результатов выполняется в журнале ПСО или предстерилизационной обработке.

Стерилизация лабораторной посуды

Это один из важнейших этапов обработки используемой лабораторной посуды. Стерилизация может быть следующей:

• физическая, например, термическая, с использованием ионизирующего излучения или ультрафиолета;
• химическая, которая предусматривается производителями лабораторной посуды.

Наиболее популярным является термический метод стерилизации с помощью горячего пара или воздуха. Это автоклавирование и сухожар. Автоклавирование выполняется для значительного уменьшения времени обработки. Способ подходит для очистки текстильного материала и разных резиновых изделий. Сухожар выбирается для обработки металлических и стеклянных инструментов или посуды.

Стерилизация стеклянной лабораторной посуды с разными обозначениями выполняется в сухожаре или автоклаве. Автоклавирование проводится при давлении в 2 атмосферы и температуре 133 градуса в течение 20 минут. Обработка в сухожаре выполняется в течение 60 минут при температуре 180 градусов, а также 150 минут при 130 градусах.

В некоторых случаях стерилизация выполняется с помощью электромагнитного излучения в СВЧ-стерилизаторах. В это оборудование инструменты могут помещаться прямо со следами влаги. При этом обязательно учитывается маркировка лабораторной посуды. Представленный метод стерилизации обладает преимуществами перед ионизирующим излучением из-за абсолютной безвредности СВЧ-поля, но такие установки являются дорогостоящими.

Стерилизация с помощью ионизирующего способа достигается достаточно высокими дозами излучения, что требует обязательного применения защитных мер. Уничтожить все присутствующие бактерии можно с помощью обработки горячим паром в автоклаве, причём такое оборудование является простым в использовании и занимающим гораздо меньше места в помещении.

Перед помещением изделий в сухожар они высушиваются до исчезновения с поверхности видимой влаги. Для этого используются специальные сушильные шкафы, в которых температура составляет 85 градусов. Перед стерилизацией лабораторная посуда может быть упакована в специальные крафт-пакеты из плотной бумаги. Для длительного хранения могут выбираться специальные полиэтиленовые или пергаментные пакеты.

Порядок автоклавирования лабораторной посуды

1. Подготовка автоклава: Поместите стерилизуемые предметы в камеру, герметично закройте крышку. Убедитесь, что все вентили закрыты, за исключением воздухоотводящего клапана.
2. Запуск цикла: Залейте дистиллированную воду в водяную камеру и включите нагревательные элементы.
3. Удаление воздуха: Дождитесь заполнения камеры насыщенным паром, который начнет вытеснять холодный воздух. Поднимите давление до 1 атм. и полностью стравите воздух через клапан.
4. Стерилизация: По манометру доведите давление до рабочего значения (соответствующего необходимой температуре). С этого момента начинайте отсчет времени стерилизации.
5. Окончание цикла: По истечении времени отключите нагрев. Затем плавно откройте выпускной кран для стравливания пара.
6. Разгрузка: Дождитесь падения стрелки манометра до нуля. Только после этого откройте крышку. Немедленно извлеките простерилизованную посуду (оставлять её в автоклаве запрещено).
7. Завершение работы: Слейте остатки воды из камеры, оставьте автоклав открытым для просушки.

Важно: Автоклав — оборудование повышенной опасности. К работе допускается только персонал, прошедший специальное обучение и инструктаж.

Альтернативные методы стерилизации

Помимо стандартных способов, существуют следующие альтернативные техники:

1. Фламбирование (стерилизация пламенем). Мелкие детали из стекла или металла кратковременно проводят через открытое пламя горелки. Микроорганизмы на поверхности уничтожаются за счет их обугливания.
2. Кипячение. Применяется для обработки металлических инструментов и резиновых трубок. Наиболее эффективно кипячение в 2%-м растворе карбоната натрия в течение 10 минут.
3. Обработка текучим паром (при 100 °C). Проводится в аппарате Коха или в автоклаве с незакрытым выпускным вентилем. Воду нагревают до кипения, и образующийся пар омывает стерилизуемые предметы.
4. Холодная стерилизация (фильтрация). Для термолабильных органических жидкостей, разрушающихся при нагреве, применяют пропускание через стерильные мелкопористые фильтры (бактериальные фильтры), которые механически задерживают микробные клетки.
5. Пастеризация. Метод щадящего нагрева жидкостей до температуры ниже 100 °C (обычно 60–90 °C). Цель — уничтожение вегетативных (не образующих спор) форм бактерий в продуктах, которые теряют питательную ценность при кипячении (молоко, соки, пиво).

Ключевые факторы выбора метода стерилизации

Эффективность стерилизации и выбор оптимального метода зависят от совокупности следующих параметров:

1. Характеристики материала изделия. Учитывается тип сырья и его устойчивость к термическому или химическому воздействию.
2. Конструктивные особенности. Наличие сложных элементов (крутые изгибы, замкнутые полости, слепые каналы) препятствует прямому контакту стерилизующего агента с поверхностью, что снижает качество обработки.
3. Качество предварительной очистки. Остаточные биологические загрязнения (белок, соли) и высокая микробная нагрузка (бионагрузка) существенно снижают проникающую способность стерилизующих средств.
4. Наличие биопленки. Этот фактор является барьером, защищающим микробные клетки от воздействия стерилизующего вещества.
5. Геометрия просветов. Длинные каналы затрудняют проникновение средства, а слишком узкие диаметры зачастую требуют создания принудительного потока для достижения стерильности.

Решающее значение имеют рекомендации производителя изделия, изложенные в инструкции по обработке.